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大家知道不论动物、植物、还是微生物,他们的基本组成单位都是细胞。为了更方便地了解细胞,人们发明了细胞培养的技术。细胞培养是当前细胞生物学,乃至整个生命科学研究及生物工程中最基本的实验技术。
我们人类生活,需要基本的“衣食住行”,来满足我们最基本的生存需要。那么,形形色色不同类型的细胞在体外生存需要什么条件呢?也就是说细胞在体外是怎样培养的呢?
●首先,我们来看一下动物细胞是如何进行体外培养的。
(1)动物细胞体外培养分为原代培养和传代培养。
原代培养是从机体的特定部位获取细胞,然后在细胞培养容器中立即培养的方法。这种原代培养的细胞一般在体外增殖潜力有限,如果我们把更换一次培养基算作培养了1代的话,这种原代细胞在体外培养一般不超过10代。随之出现的是细胞衰老和凋亡。极少的情况下,个别细胞可以一直保持分裂能力,成为永生细胞。
传代培养是指细胞在容器中培养一段时间后,细胞群体过量,营养物质耗尽,需要稀释细胞数量,重新更换培养基的过程。进行传代培养的细胞一般都是永生细胞,也就是没有代数限制,可以一直在体外培养的细胞。这种细胞绝大部分都是肿瘤细胞来源的,很少由原代培养细胞直接转变而来。
(2)动物细胞培养需要什么条件呢?
首先就是培养基,这是细胞生存所需要的粮食。培养基一般由合成培养基与小牛血清配制而成,合成培养基中含有氨基酸、维生素、糖类、无机盐等,小牛血清中含有细胞生长所必须的生长因子、激素及一些必要的营养因子。这些装有红色或粉色液体的就是培养细胞用的培养瓶或培养板,这些细口瓶中装的就是复合培养基。动物细胞要在绝对无菌的条件下培养,需要的适宜温度大约在36.5±0.5,pH7.2-7.4,空气中要含有5%CO2 。
(3)为了实现细胞的体外培养,需要把细胞放入特定的培养箱中,以保证环境中温度、湿度、pH值的相对恒定。
这时的细胞已经很密集了,需要我们进行分离和传代处理了,具体的操作过程如下:
如果是贴壁生长的细胞,首先要对细胞进行清洗,然后加入胰蛋白酶消化液并轻轻晃动培养瓶,待细胞悬浮后收集细胞进行离心,对离心得到的细胞根据需要分瓶,加入新的培养基后再培养。对于悬浮生长的细胞,直接通过离心收集细胞即可。
●在了解了动物细胞的培养后,我们再来学习一下植物细胞的培养。
植物细胞培养的培养基相对简单,主要是一些无机盐、微量元素和少量营养物质等。植物细胞培也需要无菌条件,而且常常需要光照。植物细胞培养有原生质体培养、悬浮细胞培养、单倍体培养和愈伤组织培养等。
植物细胞培养在人们的生产和生活中有着很重要的作用,迄今为止,全世界已对近1000余种植物进行过细胞培养方面的研究,生产的天然产物包括药品、香料、色素、食品、化妆品等500多种。