显微镜的使用
【实验目的】
1.掌握显微镜的使用。
2.熟悉显微镜的构造。
3.了解光镜下细胞的基本构造。
【实验准备】
1.B203光学显微镜
2.甲状腺切片(HE染色)
3.擦镜纸、二甲苯、乙醚、酒精、棉签等
【实验学时】
1学时
【实验方法与内容】
1.光学显微镜的构造
普通光学显微镜由机械和光学两部分构成(实验图1-1)
实验图1-1 光学显微镜的构造
(1)机械部分
①镜座:是显微镜的底座,用以支撑和稳定镜体。
②镜臂:是显微镜的支柱,是手持握的部位。
③载物台:是放置切片标本的平台,中央有通光孔,其上装有玻片夹和标本推进器,用来固定玻片和移动标本。在载物台的左侧下方推进器螺旋,用于前后、左右方向移动玻片。
④镜筒:位于镜臂的上方,上端装有目镜,下端连接物镜转换器。
⑤调焦螺旋:位于镜臂的两侧,用于调节物镜与载物台间的距离,从而调节焦距。常有两组调焦螺旋,即粗调螺旋和细调螺旋,分别进行较大幅度的调节和较精细的调节。
⑥物镜转换器:是安装在镜筒下方的圆盘,可自由旋转,转换物镜。
(2)光学部分
①目镜:装在镜筒的上端,其上标有“5×”、“l0×”、“l5×”等放大倍数。
②物镜:装在旋转盘的下面,一般分为低倍镜(4×、10×)、高倍镜
(40×)和油镜(l00×)。
显微镜放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数
③聚光器:位于载物台的下方,用于增强视野的亮度。在聚光器右侧有聚光器升降螺旋,可使聚光器升降,从而调节视野的亮度。聚光器的底部装有光圈,可开大或缩小,控制光线的进入量。
④光源:位于聚光器的下方,镜座左侧有亮度调节开关。
2.显微镜的使用方法
(1)准备
右手握住镜臂、左手托住镜座将显微镜从镜柜中取出,放置在实验台的偏左侧,以镜座的后端离实验台边缘约6~250px为宜。首先检查显微镜的各个部件是否完整和正常。
(2)低倍镜的使用方法
①对光:打开显微镜的电源开关,转动粗调螺旋,使载物台下降,调节物镜转换器,使低倍镜转到工作状态(即对准通光孔),当镜头完全到位时,可听到轻微的叩击声。打开光圈并使聚光器上升到适当位置。然后用双眼向目镜内观察,可见白亮的视野。
②放置玻片标本:将玻片标本放置到载物台上用压片夹固定好(注意:使有盖玻片或有标本的一面朝上),然后转动标本推进器螺旋,使需要观察的标本部位对准通光孔的中央。
③调节焦距:用眼睛从侧面注视低倍镜,同时用粗调螺旋使载物台上升,直至低倍镜头距玻片标本的距离约15px。然后用双眼在目镜上观察,同时用左手慢慢转动粗调螺旋使载物台下降直至视野中出现物像为止,再转动细调螺旋,使视野中的物像最清晰。如果需要观察的物像不在视野中央,甚至不在视野内,可用标本推进器前后、左右移动标本的位置,使物像进入视野并移至中央。
(3)高倍镜的使用:①先在低倍镜下找到需要放大观察的结构,并将其移至视野中央,同时把物像调节到最清晰的程度。②转动转换器,将高倍镜对准通光孔。③观察目镜,用细调螺旋调节焦距(禁止使用粗调螺旋),直到物像清晰为止。
需要更换玻片标本时,先转开物镜,下降载物台,再换标本片,然后按以上操作顺序从低倍镜到高倍镜重新调节。
3.细胞结构的观察
甲状腺切片观察:低倍镜下可看到许滤泡,换用高倍镜观察单层立方上皮的形态。
4.使用显微镜注意事项
(1)取用显微镜时,应一手紧握镜臂,一手托住镜座,不要用单手提拿,以避免目镜或其它零部件滑落。
(2)不可随意拆卸显微镜上的零部件,以免发生丢失损坏或使灰尘落入镜内。
(3)显微镜的光学部件不可用纱布、手帕、普通纸张或手指揩擦,以免磨损镜面,需要时只能用擦镜纸轻轻擦拭。机械部分可用纱布等擦拭。
(4)在任何时候,特别是使用高倍镜或油镜时,避免镜头与玻片相撞,损坏镜头或玻片标本。
(5)显微镜使用完后应及时复原。下降载物台,取下玻片标本,使物镜转离通光孔。下降聚光器,关闭光圈,关闭电源,最后放回镜箱或镜柜中锁好。
(6)在利用显微镜观察标本时,要养成两眼同时睁开,双手并用的习惯,必要时应一边观察一边计数或绘图记录。
【实验评价】
完成实验报告
(占小多 鲍耀波)

