1、  病症观察

  （ 1） 了解症状      （2）分析感染部位     （3） 推测感染病原

   病症观察：各种皮疹的比较

          

                                      麻疹                                                                水痘                                                                                                                                                      

2、显微镜检查

取样观察病原的形态特征，确定病原的性质，了解感染的情况。

观察免疫细胞的数量，了解体内炎症情况。

          

3、微生物培养

从样品中分离微生物，进行培养，了解微生物的：营养需要、代谢特征，宿主。

                                                                 微生物对糖的利用

                                                              微生物对柠檬酸的利用

                                                        用于快速诊断的培养基试剂盒

4、生物化学检验

有些感染会造成生理代谢变化，产生特征性的物质，可以作为诊断的工具。肝炎病毒感染造成血液中转氨酶水平上升，可用于诊断。

                                                                   自动生化分析仪

5、免疫学技术

利用抗原-抗体反应的特异性来诊断特定的病原感染。对于显微镜下难以看见的病毒等微生物的感染尤其有用，主要针对蛋白质进行检测。

1、准备抗体

2、标记抗体    

     标记物----- 酶：加入合适的试剂后可显色

     荧光分子：可发出荧光

     放射性同位素：产生射线

3、检测病原体

6、分子生物学方法

1、核酸杂交

    利用核苷酸间的特异性配对进行检测

     将DNA点在膜上变形为单链DNA    将双链DNA变形计的标记探针     将双链DNA计的标记探针                                                   

                                                                          

2、生物芯片——高度密集的核酸杂交

   借助微量精密操作技术，高效率地检测不同基因的表达。

   一般过程----将不同的基因探针点在介质（玻璃，高分子材料等）上 

              从细胞中提取总RNA，并用荧光或同位素标记

              将细胞RNA与介质上的基因（DNA）进行杂交，洗去未杂交的RNA

              用生物芯片扫描仪测定每一点上的信号，确定细胞中是否有特定的RNA及RNA的水平                  

3、多聚酶链式反应 （PCR）

    通过将微量的核酸扩增来检测病原

    材料--- 模板：样品中原有的核酸

               引物：DNA复制必须要有一小段DNA作为先导物，可以设计特殊引物来扩增特定的DNA序列

               高温多聚酶：能在高温下保持活性的酶

    原理----高温下双链DNA变性成单链

                降低温度让引物和模板配对

                高温聚合酶合成新的DNA

                如此循环往复多次

PCR反应：第一轮

PCR反应：第二轮

PCR反应：第三十轮

4、核酸序列分析

   对于一些难以判定的病原，特别是新的或是变异的病原，有时需要通过序列测定来了解病原的特性。

   新一代核酸序列测定的方法：成本大大降低，效率大大提高，可能彻底改变疾病检测和预防。

                                         DNA测序的成本降低速度之快使“摩尔定律”相形见绌

 

参考书籍